研究报告/Research Report

海岛棉GbDET2基因的克隆及表达分析  

陈全家1,2 , 刘超2 , 倪志勇2 , 冯文林2 , 刘静静2 , 陈章良1 , 康定明1 , 曲延英2
1 中国农业大学农学与生物技术学院, 北京, 100193;
2 新疆农业大学农学院, 新疆农业大学农业生物技术重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 14 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000119
收稿日期: 2014年02月24日    接受日期: 2014年04月08日    发表日期: 2014年04月17日
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摘要

类固醇5α-还原酶(DET2),被认为是油菜素类固醇物质(BRs)生物合成的限速酶。为了明确BRs在棉花纤维发育中的作用,本研究利用RT-PCR方法从纤维组织中获得基因开放阅读框(ORF)全长,经测序验证、Blast比对与同源性分析发现该序列编码的蛋白质与其他植物的DET2蛋白具有较高的相似性,故命名为GbDET2基因。生物信息学分析结果表明,GbDET2基因ORF长777 bp,可编码1个包含258个氨基酸的蛋白。氨基酸多序列比对发现GbDET2序列保守性较高,具有的DET2的典型特征。通过物种间系统发育树可以看出GbDET2GhDET2进化关系最接近,二者属于同一进化分支。实时荧光定量PCR分析表明,GbDET2基因在纤维发育的不同时期中均有表达,在开花后5 d的胚珠、10 d的纤维中其表达量最高。研究结果显示GbDET2基因在棉花纤维的起始和快速伸长过程中发挥着重要的作用。

关键词
海岛棉(Gosypium barbadense L.);GbDET2基因;棉花纤维基因表达;油菜素类固醇物质(BRs)

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《分子植物育种》印刷版
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